3.母種分離方法 有孢子彈射、組織分離和基質(zhì)菌絲分離3種方法。這里主要介紹組織分離方法。組織分離方法：即切取各菇上小塊組織移接于斜面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)成母種。食用菌的子實(shí)體實(shí)際上就是雙核菌絲的紐結(jié)物，它具有很強(qiáng)的再生能力。因此，只要切取一小塊組織，把它接種到適宜的培養(yǎng)基上，適溫培養(yǎng)，就能得到純菌絲體。組織分離是把選好的種菇帶入無菌室，在超凈工作臺(tái)上，用75%的酒精棉揩拭菌蓋與菌柄，再用經(jīng)火焰滅菌的解剖刀在菌柄的中部切開。使菇體形成對(duì)開。在菌蓋和菌柄交界處或菌褶處，用接種刀切取一小塊菇體，然后縱切成5毫米×10毫米的小薄片，用接種針挑取一塊薄片，接入斜面培養(yǎng)基的中央，每支試管接種一小塊薄片，待其萌發(fā)菌絲，即可得到母種。
4.適溫培養(yǎng) 將上述試管放入已消毒的培養(yǎng)箱或培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)，溫度控制在25℃左右，使分離獲得的孢子或菌絲在適溫下發(fā)育。組織分離接種后二三天，菌絲即萌發(fā)，并在培養(yǎng)基上蔓延生長(zhǎng)；菇體分離接種后，一般情況下組織塊先轉(zhuǎn)為黑褐色，大約7天后組織培養(yǎng)塊上長(zhǎng)出白色絨毛狀菌絲。
5.母種的提純 在菌絲萌發(fā)后，要認(rèn)真觀察，挑選色澤純、健壯、長(zhǎng)勢(shì)正常和無間斷的菌線，在無菌室超凈工作臺(tái)上連同培養(yǎng)基鉤取菌絲，接人另備的試管培養(yǎng)基上。在23℃～25℃的恒溫條件下，培養(yǎng)7天～10天，待菌絲長(zhǎng)滿試管后，再進(jìn)行觀察，從中擇優(yōu)取用，即為“母代”母種。
6.母種的轉(zhuǎn)管培養(yǎng) 將一支長(zhǎng)滿菌絲的試管在無菌操作下，分別轉(zhuǎn)接到多只試管中培養(yǎng)。一般每支母種可擴(kuò)接30支～50支，生產(chǎn)上供應(yīng)的多為子代母種。它可以再次轉(zhuǎn)管擴(kuò)接。一般每支又可擴(kuò)接成20支～25支子代母種，但轉(zhuǎn)管次數(shù)不得超過4次。因轉(zhuǎn)管代數(shù)過多易使菌種生活力降低。
7.出菇試驗(yàn) 把母種接種于瓶裝或袋裝的木屑培養(yǎng)基上，根據(jù)各種菇的種性對(duì)溫度的要求，進(jìn)行適溫培養(yǎng)，直至出菇才證實(shí)可用于生產(chǎn)。
二、原種繁殖培養(yǎng)
將母種接在瓶裝或袋裝的木屑培養(yǎng)基上，通過培養(yǎng)，即成原種。
三、栽培種擴(kuò)大培育
將原種再次擴(kuò)接在同樣的木屑培養(yǎng)基上，在適溫條件下培養(yǎng)30天～35天即為栽培種（又叫生產(chǎn)種），可用于生產(chǎn)栽培。
4.適溫培養(yǎng) 將上述試管放入已消毒的培養(yǎng)箱或培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)，溫度控制在25℃左右，使分離獲得的孢子或菌絲在適溫下發(fā)育。組織分離接種后二三天，菌絲即萌發(fā)，并在培養(yǎng)基上蔓延生長(zhǎng)；菇體分離接種后，一般情況下組織塊先轉(zhuǎn)為黑褐色，大約7天后組織培養(yǎng)塊上長(zhǎng)出白色絨毛狀菌絲。
5.母種的提純 在菌絲萌發(fā)后，要認(rèn)真觀察，挑選色澤純、健壯、長(zhǎng)勢(shì)正常和無間斷的菌線，在無菌室超凈工作臺(tái)上連同培養(yǎng)基鉤取菌絲，接人另備的試管培養(yǎng)基上。在23℃～25℃的恒溫條件下，培養(yǎng)7天～10天，待菌絲長(zhǎng)滿試管后，再進(jìn)行觀察，從中擇優(yōu)取用，即為“母代”母種。
6.母種的轉(zhuǎn)管培養(yǎng) 將一支長(zhǎng)滿菌絲的試管在無菌操作下，分別轉(zhuǎn)接到多只試管中培養(yǎng)。一般每支母種可擴(kuò)接30支～50支，生產(chǎn)上供應(yīng)的多為子代母種。它可以再次轉(zhuǎn)管擴(kuò)接。一般每支又可擴(kuò)接成20支～25支子代母種，但轉(zhuǎn)管次數(shù)不得超過4次。因轉(zhuǎn)管代數(shù)過多易使菌種生活力降低。
7.出菇試驗(yàn) 把母種接種于瓶裝或袋裝的木屑培養(yǎng)基上，根據(jù)各種菇的種性對(duì)溫度的要求，進(jìn)行適溫培養(yǎng)，直至出菇才證實(shí)可用于生產(chǎn)。
二、原種繁殖培養(yǎng)
將母種接在瓶裝或袋裝的木屑培養(yǎng)基上，通過培養(yǎng)，即成原種。
三、栽培種擴(kuò)大培育
將原種再次擴(kuò)接在同樣的木屑培養(yǎng)基上，在適溫條件下培養(yǎng)30天～35天即為栽培種（又叫生產(chǎn)種），可用于生產(chǎn)栽培。
