1、干熱滅菌。
由于一般玻璃用具,培養(yǎng)皿、吸管等將滅菌材料。用報紙包好后,放入烘箱中。使溫度逐漸升至150―160℃保持2小時后,關(guān)閉電源。使緩慢冷卻。(降溫太快時玻璃易碎)即滅菌完畢。
2、濕熱滅菌。
①、常壓法 常壓滅菌是用蒸汽鍋(或普通鍋)蒸的方法。溫度達到100℃起一般需要4―6小時,溫度不超過100℃時,根據(jù)滅菌量的多少,一般保持在8―24小時。即可達到無菌效果。在沒在高壓滅菌設(shè)備或在高溫滅菌易破壞的培養(yǎng)基情況下多采用此法。另常壓滅菌還有間歇滅菌法。 此法比較麻煩,通常必須進行三次。每次一小時,因為第一次蒸后,其中營養(yǎng)細胞被殺死,而其芽胞還保持著活力,所以蒸后,將培養(yǎng)基放入溫箱中24小時,待其芽胞萌發(fā)后,再蒸第二樣再經(jīng)24小時,蒸第三次,這樣才能滅菌徹底。
②、高壓法 此法乃是利用高壓蒸汽殺菌鍋進行滅菌,當用蒸汽滅菌時,如鍋內(nèi)增加壓力,則溫度亦隨之增高,例如壓力0.56公斤/厘米2=0.55帕斯卡。溫度為112.6℃;如壓力1公斤/厘米2=0.98帕斯卡。溫度可達120―121℃。通常理想滅菌干120℃,20分鐘能達到目地。115℃、30分鐘也就可以了。使用高壓殺菌鍋時要分別注意兩點。1、增壓前必須把鍋內(nèi)冷空氣排盡,否則壓力雖然升高,而其溫度達不到要求。2、滅菌完畢后,應(yīng)使鍋內(nèi)壓力徐徐下降,不然,容皿中液體會噴出。棉塞也易脫落,致使前功盡棄,在無烘箱時,其它器皿也可用溫熱滅菌,滅菌前應(yīng)該用紙包好。
3、火焰滅菌。
對于接種針或其它金屬用具的滅菌,可直接在酒精燈火焰上燒至紅熱,此外,在接種過程中,試管或三角瓶口,也采取通過火焰而達到滅菌的目地。
4、藥物滅菌。
①、70%酒精,用于冷卻燒紅后的接種針,操作前手或用具的表面殺菌,載玻片,蓋玻片的浸泡等。 ②、新潔爾滅、 市售一般為5%溶液,用時稀釋至萬分之一到千分之一,用于工作環(huán)境和器皿表面的滅菌。③、 0.1%升汞液:用于材料表面的殺菌,用具或廢棄的培養(yǎng)物實驗后的處理。④、福爾馬林(40%由醛溶液):用于空間的熏蒸滅菌,加熱或加高錳酸鉀使放盡甲醛氣體,注意將空間密閉并維持24小時
5、紫外線滅菌,用于接種室等的空氣滅菌。
由于一般玻璃用具,培養(yǎng)皿、吸管等將滅菌材料。用報紙包好后,放入烘箱中。使溫度逐漸升至150―160℃保持2小時后,關(guān)閉電源。使緩慢冷卻。(降溫太快時玻璃易碎)即滅菌完畢。
2、濕熱滅菌。
①、常壓法 常壓滅菌是用蒸汽鍋(或普通鍋)蒸的方法。溫度達到100℃起一般需要4―6小時,溫度不超過100℃時,根據(jù)滅菌量的多少,一般保持在8―24小時。即可達到無菌效果。在沒在高壓滅菌設(shè)備或在高溫滅菌易破壞的培養(yǎng)基情況下多采用此法。另常壓滅菌還有間歇滅菌法。 此法比較麻煩,通常必須進行三次。每次一小時,因為第一次蒸后,其中營養(yǎng)細胞被殺死,而其芽胞還保持著活力,所以蒸后,將培養(yǎng)基放入溫箱中24小時,待其芽胞萌發(fā)后,再蒸第二樣再經(jīng)24小時,蒸第三次,這樣才能滅菌徹底。
②、高壓法 此法乃是利用高壓蒸汽殺菌鍋進行滅菌,當用蒸汽滅菌時,如鍋內(nèi)增加壓力,則溫度亦隨之增高,例如壓力0.56公斤/厘米2=0.55帕斯卡。溫度為112.6℃;如壓力1公斤/厘米2=0.98帕斯卡。溫度可達120―121℃。通常理想滅菌干120℃,20分鐘能達到目地。115℃、30分鐘也就可以了。使用高壓殺菌鍋時要分別注意兩點。1、增壓前必須把鍋內(nèi)冷空氣排盡,否則壓力雖然升高,而其溫度達不到要求。2、滅菌完畢后,應(yīng)使鍋內(nèi)壓力徐徐下降,不然,容皿中液體會噴出。棉塞也易脫落,致使前功盡棄,在無烘箱時,其它器皿也可用溫熱滅菌,滅菌前應(yīng)該用紙包好。
3、火焰滅菌。
對于接種針或其它金屬用具的滅菌,可直接在酒精燈火焰上燒至紅熱,此外,在接種過程中,試管或三角瓶口,也采取通過火焰而達到滅菌的目地。
4、藥物滅菌。
①、70%酒精,用于冷卻燒紅后的接種針,操作前手或用具的表面殺菌,載玻片,蓋玻片的浸泡等。 ②、新潔爾滅、 市售一般為5%溶液,用時稀釋至萬分之一到千分之一,用于工作環(huán)境和器皿表面的滅菌。③、 0.1%升汞液:用于材料表面的殺菌,用具或廢棄的培養(yǎng)物實驗后的處理。④、福爾馬林(40%由醛溶液):用于空間的熏蒸滅菌,加熱或加高錳酸鉀使放盡甲醛氣體,注意將空間密閉并維持24小時
5、紫外線滅菌,用于接種室等的空氣滅菌。