(一)細(xì)菌學(xué)檢查
鼻外部消毒后,用無(wú)菌棉拭子插出鼻腔中較深的部位,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)幾次,使其沾上黏液或分泌物,立即放人裝有肉湯的小試管中,塞緊管塞,送檢。也可直接無(wú)菌采取鼻腔后部、支氣管的分泌物及肺組織等。
4h內(nèi)進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng),可應(yīng)用改良馬丁瓊脂(含牛裂解血球液0.1%、牛血清2%、鹽酸潔霉素1μg/mL,硫酸新霉素1.9μg/m L)平板和血紅素痢特靈改良麥康凱瓊脂(彭發(fā)泉等1986)平板,37℃培養(yǎng)18h分離Pm,培養(yǎng)44h分離Bb 。 Bb分離株依據(jù)菌落特征和平板凝集反應(yīng)加以鑒定,Bb37℃培養(yǎng)24h,菌落呈針尖大??;48h菌落為2mm大,呈灰褐色,半透明狀、隆起、光滑,有特殊霉臭味。涂片、染色、鏡檢。革蘭染色,可見(jiàn)到革蘭陰性小桿菌,有兩極著色的趨勢(shì)。
生化鑒定,支氣管敗血波氏桿菌主要的生化特點(diǎn)是:有運(yùn)動(dòng)性,甲基紅試驗(yàn)、VP試驗(yàn)均為陰性,不分解葡萄糖二分解尿素,能利用枸櫞酸鹽,過(guò)氧化氫酶和氧化酶試驗(yàn)均為陽(yáng)性。
(二)Pm分離株的產(chǎn)毒素能力檢查
采用豚鼠皮膚壞死試驗(yàn)( DeJong,M.F.1980)進(jìn)行。用馬丁肉湯37℃培養(yǎng)36h的菌液O.lmL注射于體重350g的健康豚鼠背部皮內(nèi),觀察72h。皮膚出現(xiàn)直徑大于0.5cm以上的壞死區(qū)為陽(yáng)性反應(yīng)(DNT+),無(wú)反應(yīng)或僅一過(guò)性紅腫為陰性(DNT-)。
(三)X射線攝片檢查